本文报道了一种急性心肌梗死生物标志物，即心脏型脂肪酸结合蛋白（H-FABP）的高灵敏度比率荧光侧流免疫测定（RFLFIA）试纸的设计。RFLFIA条的工作原理是荧光信号的比例变化，这是由两个复合纳米结构发射的荧光混合而成的，该复合纳米结构通过蛋白特异性相互作用进行捕获目标蛋白和检测抗体，并具有金纳米颗粒的内部过滤作用。结合使用基于智能手机的定制分析设备，可以实现H-FABP的定量检测，且检测限较低，为0.21ng/mL。RFLFIA试纸条可以在H-FABP的阈值浓度（6.2ng/mL）附近产生视觉上可辨别的绿色到红色的颜色变化，因此可以通过肉眼进行半定量诊断。
图1.a）-h）dSiO2（a）、单个dSiO2（b）、AuNPs（c）、rQDs（d）、dSiO2/AuNPs（e）、dSiO2/AuNPs/SiO2（f）、dSiO2/AuNPs/SiO2/rQDs（g）和SAQ（h）的TEM图像。i）SAQ的HAADF-STEM图像。j）单个SAQ纳米球的不同元素（j1-j7）的EDS图像。
图2.a）gQDs的激发（曲线I）、发射（曲线II）光谱和AuNPs（曲线III）和SAQ球体（曲线IV）的吸收光谱。b）与dSiO2/AuNPs/SiO2-mAb1（红色曲线）、SAQmAb1（蓝色曲线）、SAQ-mAb1和H-FABP（绿色曲线）混合后mAb2-gQDs（黑色曲线）的发射变化。mAb2-gQDs、dSiO2/AuNPs/SiO2-mAb1、SAQ-mAb1和H-FABP的浓度分别为1.4nM、20mg/mL、20mg/mL和1mg/mL。c,d）RFLFIA试纸在阴性（c）和阳性测定（d，50ng/mL）后的照片（i），荧光（ii）和SEM图像（iii）。红色箭头注释T线中捕获的SAQ球体。
图3.a）基于智能手机的便携式荧光读取设备的图示。b）不同浓度H-FABP（0至50ng/mL）下RFLFIA和常规FLFIA条的荧光图像。c）d）RFLFIA条带T线的色调(c)、R和G（d）值对H-FABP浓度的依赖性。e）RFLFIA条带T线的R/G比与H-FABP浓度的关系。插图显示了低浓度范围内R/G比的浓度依赖性。f）g）传统FLFIA条带T线的色调（f）和R（g）值对H-FABP浓度的依赖性。h）常规FLFIA条带T线R值与H-FABP浓度的关系。插图：R值在低浓度范围内的线性相关性。
图4.a）-c）照片（a）、荧光图像（b）和相应的直方图（c），用于显示RFLFIA测试条对H-FABP检测的特异性。d）30份H-FABP浓度为2.5～42.9ng/mL的人血清样本RFLFIA与临床乳胶凝集试验检测结果的相关性分析。
图5.a）6种不同浓度H-FABP下RFLFIA条带T线和C线的荧光照片。b）11个独立用户对含有不同浓度H-FABP的6个样品进行3次分析的半定量肉眼读数结果。
DOI:10./anie.
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