文末有《临床流式细胞学-检验技术》书籍赠送！
在过去的几十年中，临床实践的进步已使ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者的死亡率大幅下降。一个主要的贡献是及时地恢复了冠状动脉的血流，这是当今通过经皮冠状动脉介入治疗（PCI）最有效的方法。值得注意的是，最终的梗死面积与急性心梗后的发病率和死亡率密切相关。在这方面，缺血/再灌注损伤（IRI）现象指缺血心肌再灌注后组织损伤的急性加重。到目前为止，针对IRI的几种干预措施在大规模临床随机对照试验中均未通过测试。同样，针对减少梗死引起的心肌疤痕以提高心功能的干预措施（如，(干)细胞治疗）也尚未在临床获得成功。因此，仍然迫切需要解决IRI和STEMI后心力衰竭的发展。远端缺血性调节（RIC）描述了一种现象，当通过在远程组织或器官中进行所谓的缺血性调节来保护组织免受IRI侵害。尽管RIC对心脏的确切保护机制尚有争议，但在不同的缺血/再灌注损伤动物模型中进行的研究却显示出有效的心脏保护作用。此外，针对急性心肌梗死的人进行的原则验证试验初步报告了有希望的结果。在临床实践中，RIC可以通过在肢体上施加血压袖带，强力充气以引入局部缺血几分钟，然后放气（肢体再灌注）并通常重复此循环三到五次来进行。如前所述，尽管这种干预在几种动物模型中提供了强大的作用，但如对随机对照试验的meta分析所示，对人的潜在作用却是令人怀疑的。此外，最近发表的一项有力的研究表明，RIC对心力衰竭和心力衰竭住院的影响是中性的。近来，已显示出由细胞释放的小脂质双层包裹的囊泡，称为细胞外囊泡（EVs），自身具有心脏保护作用。EVs在细胞之间运输蛋白质、脂质和微核糖核酸，被认为是细胞通讯的工具。这使它们具有成为多种疾病（包括心血管疾病）中生物标志物的高潜力，并成为潜在的治疗靶标。此外，以前的研究表明，RIC对循环EVs有影响，这与心脏保护有关。这些观察主要基于动物模型，但是人类的数据很少。因此，该研究的目的是在一项随机对照试验中研究RIC对STEMI患者急性和亚急性期循环EV的影响。方法：将接受原发性经皮冠状动脉介入治疗（PCI）的ST抬高型心肌梗塞（STEMI）患者随机分组，以另外接受RIC或假手术干预。在PCI之前和之后立即、24小时、4天和1个月采血。此外，探究了接受RIC的健康志愿者的EVs。EVs的特点通过具有高灵敏度的流式细胞仪（BeckmanCoulterCytoflexS）鉴定。结果：分析了32例患者（16RIC，16例对照）和5名健康志愿者。探究了血小板、内皮细胞、白细胞、单核细胞和粒细胞衍生的EVs及其表面表达磷脂酰丝氨酸（PS+）的血栓前亚群。尽管RIC组中粒细胞衍生的EV明显更高，但并未观察到RIC对循环EV数量的显著影响。同样，RIC对健康志愿者的EVs没有影响。此外，观察到STEMI后PS+/PEV、EEV和PS+/CD15+EV的变化与RIC无关。结论：为STEMI急性期和亚急性期的不同循环EVs的特征提供了进一步的见解。对于所调查的EVs群体，RIC似乎没有影响，在粒细胞EVs上只有很小的差异。检测细胞外囊泡（EV）的方法学考虑。（A）在侧向散射（violetSSC-H）/正向散射图（FSC-H）中使用nm硅珠设置尺寸上限。（PhycoerythrinCyanin7）PC7（B）和（Phycoerythrin）PE（C）的Isotype对照用于设置门。（D）在每次测量之前，都要用无菌水洗涤，以确保系统清洁并避免溢出。（E）使用triton破坏标记的EV，以确认其存在（EV门的绝对数量：/μL血浆）。相比之下，（F）提供了常规染色样品的散点图（EV门绝对数：EVs/μL血浆）。循环血小板和内皮EVs的数量变化循环白细胞衍生EVs的数量变化关于Cytoflex超灵敏流式细胞仪流式细胞仪分析是进行细胞亚群分析的金标准，但由于检测极限的限制，无法直接进行细胞外囊泡的流式分析。但是cytoFLEX的出现改变了这一状况，将检测直径和检测灵敏度带入了新阶段。CytoFLEX是由贝克曼库尔特生命科学事业部推出的一系列流式细胞仪。它化繁为简，能应用于各类复杂的应用并适应各类型的检测样本。其可靠的采样和流体系统设计支持微量上样管的样本获取，样本上样体积最小达到10ul。CytoFLEX在多参数应用中同样展现出强大实力，对微颗粒的检测大小极限可低至75nm。既可以用于细胞外囊泡分析，也可以用于常规的细胞分析，甚至一些直径较大的病*颗粒也可以直接检测。JEV：高灵敏度荧光激活分选证实血浆EV核酸库的异质性肿瘤细胞外囊泡：分离和分析方法的进展和挑战一种新型增强光散射灵敏度的流式细胞仪用于生物纳米颗粒的分析JEV：怎样追溯血浆中细胞外囊泡的细胞起源点击左下角阅读原文或扫